正常者ならびに各種副腎皮質疾患における 18 - hydroxy - 11 - deoxycorticosterone ¿ 18 - hydroxycorticosterone の動態
東北大学医学部第2病理学教室 (主任:笹野伸昭教授)
帝国臓器製薬 · 薬理研究部 * 1
小 島 元 子,神戸川 明*
In Vivo and In Vitro Studies on 18-Hydroxy-11-deoxycorticosterone and 18-Hydroxycorticosterone in Normal Subjects and in those with Various Adrenocortical Disorders
Motoko OJIMA Department of Pathology, Tohoku University School of Medicine, Sendai, Japan (Director: Prof. Nobuaki Sasano)
Akira KAMBEGAWA
Department of Pharmacological Research, Teikoku Hormone Mfg., Co., Ltd.
Simultaneous measurement of 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone (18-OH-DOC) and 18-hydroxycorticosterone (18-OH-B) in the peripheral plasma was carried out on normal subjects and in patients with adrenocortical disorders.
The mean plasma levels of 18-OH-DOC at 0800h in normal males and in the follicular and luteal phases of normal females were 8.2 ± 3.9 ng/100ml (Mean ± SD), 7.8 ± 2.6 ng/ 100ml and 11.5 + 2.8 ng/100ml, respectively. The corresponding levels of 18-OH-B in normal males and in the follicular and luteal phases of normal females were 10.3 + 4.2 ng/ 100ml, 12.4 ± 4.5 ng/100ml and 13.8 ± 4.1 ng/100ml, respectively. No differences between the sexes nor the phases of the menstrual cycle were confirmed.
ACTH stimulation increased plasma concentrations of 18-OH-DOC and 18-OH-B by 5.1 and 4.4 times respectively, while dexamethasone markedly decreased these 2 steroids. An upright posture increased these steroids significantly.
In patients with Cushing syndrome, plasma levels of these 2 steroids were rarely high in cases with adrenocortical hyperplasia and adrenocortical carcinoma, while they were usually within the normal range in adrenocortical adenoma. These 2 steroid levels were
increased in primary aldosteronism, idiopathic hyperaldosteronism and congenital 17a- hydroxylase deficiency. They were decreased in Addison’s disease and the salt-loosing type of congenital 21@-hydroxylase deficiency. Patients with congenital 21@-hydroxylase de- ficiency (simple form) showed elevated levels of 18-OH-DOC and normal levels of 18-OH-B.
In vitro production of 18-OH-DOC and 18-OH-B was studied by tissue slices of the normal adrenal cortex, adrenocortical carcinoma causing Cushing syndrome, aldosteronoma and nodular hyperplasia with hyperaldosteronism. In the normal adrenal cortex, the mean production rates of 18-OH-DOC and 18-OH-B were 31 and 26 ng/g tissue/hr, respectively. ACTH and angiotensin II significantly increased the production of both 18-OH-DOC and 18-OH-B. In adrenocortical carcinoma, the production of these steroids was markedly diminished and not stimulated with either ACTH or angiotensin II. Aldosteronoma tissue produced these 2 steroids 20~40 times that of the normal adrenal tissue and was signifi- cantly increased with the addition of ACTH and angiotensin II. Nodular hyperplasia with hyperaldosteronism produced much 18-OH-DOC and 18-OH-B, but did not respond to ACTH and angiotensin II.
Ⅰ. 緒 言
18 - Hydroxy - 11 - deoxycorticosterone (18 - OH - DOC) } } \‘18 - hydroxycorticosterone (18 - OH-B)は、弱い電解質作用をもち,各種高血圧症での動きが注目されている。しかし、こ の2種のステロイドの測定は普及しておらず、未だその動態の詳細は明らかではない。著者らは, 先に, 18 - OH - DOC -3 - Oxime 抗血清ならびに18- OH-B - 3 - Oxime の抗血清を用いた18 - OH -DOClと18 - OH- B2) の radioimmunoassay を開発し報告した。この方法を用いて,正常 者の対照時における 18 - OH -DOC と18- OH -B の血中濃度を測定し, ACTH, dexamethasone な らびに立位負荷時の両ステロイドの動態を検討した。また,Cushing 症候群, 原発性ならびに特発 性アルドステロン症,先天性 17α-hydroxylase 欠損症,副腎性器症候群および Addison 病患者の血 中濃度を分析し、一部の例については摘出副腎組織を用いて in vitro での両ステロイドの生成状態 について検討し、興味深い成績を得たので報告する。
Ⅱ. 実験材料ならびに方法
(1) 対象例
正常対照例としては、成人男子20例,女子10例を選んだ。いずれも血圧は正常であり、腎機能お よび肝機能に異常はなく、著患をみない。年令は、19才から36才の間にあった。女子では、月経開 始6日以内の卵胞期および次の月経開始前7日以内の黄体期中期に採血を行った。なお、後に述べ る副腎皮質疾患例も含め,対照時の採血は、朝食を止め2時間以上安静臥床後の午前8時から 9時 の間に施行した。また食塩摂取量は任意とした。
以上の正常対照例のうち7例の男子については、午前9時に合成1-24ACTH0.25mg を 1回静注 し, 1時間後に採血を行った。また,dexamethasone 1 mg を夜11時に経口投与し、翌朝8時から 9 時の間に採血するrapid dexamethasone抑制試験を施行し、更に,午前9時から 2時間の立位歩行の 負荷も行った。
副腎皮質機能異常者としては、内分泌学的に精査された Cushing 症候群13例(副腎皮質過形成 7 例,副腎皮質腺腫5例,副腎皮質癌1例),原発性アルドステロン症8例,特発性アルドステロン症 2例,先天性17α-hydroxylase欠損症2例,副腎性器症候群6例(先天性21 α-hydroxylase 欠損症 3例,副腎皮質癌3例)および Addison 病3例を選んだ。これらの症例のうち、副腎皮質腺腫によ る Cushing 症候群,原発性ならびに特発性アルドステロン症および副腎癌は、全例副腎摘出術を受 け,病理組織学的に診断がつけられた。両側副腎過形成による Cushing 症候群2 例も、手術により 組織病変が確認されている。副腎癌による Cushing 症候群例の癌組織,原発性アルドステロン症 5 例の副腎腺腫組織(うち3例については腺腫に隣接する皮質組織も),ならびに特発性アルドステロ ン症1例の副腎皮質組織については, in vitro での18- OH - DOC および18 - OH - B の生成状態 を検討した。
(2) In vitro での 18-OH -DOC ならびに18 -OH-B の生成
Incubation 方法は,既報3 に準じた。すなわち、腫瘍組織を手術により摘出されてから30分以内 に薄片にし,glucose を 200mg/100ml の割合で含んだ Krebs - Ringer bicarbonate buffer (KRB) 50ml 中に入れ,0295%,CO25%の混合ガス相下に振盪しながら37℃で1 時間 preincubation を 行った。その後、薄片を同量の KRB 中に移し、同条件下に30分間 incubate し, buffer 中に産生· 放出された両ステロイドを測定した。なお, 10-8 mole の合成 1-24 ACTH ならびに angiotensin Ⅱ を添加し、両ステロイド生成に及ぼす影響をみた。
(3) 測定法の概要
1) 試薬
ステロイド標準物質のうち18-OH- DOC は Steraroid 社製, 18 - OH -B は Fulka 社製のもの を用いた。標識ステロイドは、いずれも RCC 社製で、その specific activity は, 1, 2 -3H -18 - OH -DOC は51Ci/mmole, 1, 2 -3H -18 -OH - B は42Ci/m mole であった。いずれも0.1% の pyridine を加えた toluene,methanol 85 : 15の溶媒で thin layer chromatography を行って精製 した後に assay に供した。
Methanol, toluene, dichloromethane などの有機溶媒は、すべて和光純薬社製であり,使用当日開 栓し,0.1%の pyridine を添加して使用した。水は,再蒸留水を用いた。
2) 測定方法 1) 2)
血中の18 - OH - DOC と18-OH- B 濃度の測定方法の概要は,Table. 1 に示した。血漿1.0~ 2.0mlに,回収率の check ならびに radioimmunoassay 用に約20,000dpm の標識 18 - OH - DOD お よび 18-OH- B を加え,15倍容量の dichloromethane で抽出を行った。なお、この際 NaOH および 水による洗浄を加えた。Dichloromethane 層を減圧乾固し、残渣を Sephadex LH -20 のcolumn , (bed dimension : 1 ×55cm) に apply し,純水で展開した。18-OH - DOC および 18-OH-B分 画を採取し(Fig. 1), dichloromethane で逆抽出後,再び減圧乾固し,残渣を methanol に 溶解し て recovery の check と immunoassay に供した。18 -OH - DOC および 18 -OH -B の radioimmu- noassay は、型のごとく行った。すなわち,0~500pg の各標準ステロイドに7,000dpm の各標識ス テロイドを加え減圧乾固後,至適力価に希釈調整した抗血清を加え,4 ℃で overnight incubate し た。Bound と Free の分離は、硫安塩析法によった。
In vitro での両ステロイドの産生量の測定は, incubation buffer 0.1~2.0ml を同様に dichloro- methane で抽出後減圧乾固し,血中濃度の測定と同様の操作を加えて算出した。
Table 1. Flow sheet of the method.
Plasma 1.0-2.0 ml
3H-18-OH-DOC
3H-18-OH-B
20,000 dpm
IN NaOH
1/20 vol
Extracted with 15 vol of CH2C1 2
Washed with 0.01N NaOH and H2O
Evapolated to dryness
Sephadex LH-20 column chromatography
18-OH-DOC
fractions collected
18-OH-B
Reextracted with equivalent CH2C12
Evapolated to dryness
Recovery check
Radioimmunoassay
Ald
18-OH-
B
FB
18-OH- DOC
S
DOC
17-OHP
T
Concentration
0
50
100
150
200
250
Elution Volume (ml)
Ⅲ. 実験 結果
(1) 正常者における血中 18-OH-DOC および 18-OH -B 濃度
正常男子20例の普通食摂取下,早朝安静臥床時における血漿 18- OH - DOC 値は, 3.218.7ng/
100mlの範囲にあり, その平均は,8.2±3.9ng/100ml(Mean±SD)であった。同時に測定した血
漿 18-OH- B は, 2.719.8ng/100ml の範囲にあり,その平均は10.3±4.2ng/100ml であった。
正常女子10例では, 18- OH - DOC は3.614.8ng/100ml の範囲に分布し,その平均は7.8±2.6
ng/100ml であった。また,18 -OH -B 値は, 4.117.8ng/100ml の範囲に分布し,その平均は,
12.4±4.5ng/100mlであった。黄体期における18-OH - DOC および18- OH-B 濃度は,それぞれ
11.5±2.8ng/100ml (4.517.5ng/100ml),13.8±4.1ng/100ml (4.919.8ng/100ml)であった。
第55巻 第8号
| Plasma steroid levels | |||
|---|---|---|---|
| 18-OH-DOC | 18-OH-B | Cortisol | |
| Before | 10.6±1.9 ng/100ml | 11.3±1.8 ng/100ml | 6.5+1.5 ug/100ml |
| ACTH | 53.9±10.1 | 45.7±6.7 | 22.2±4.7 |
| Dexamethasone | 2.4±1.2 | 2.2±0.9 | 1.3±0.6 |
| Upright posture (2hr) | 18,3±3.2 | 20.313.8 | 4.6±1,2 |
(2) 正常者における各種負荷試験成績
(Table. 2)
1) ACTH 負荷
ACTH 負荷を行ったところ,血漿18 -OH -DOCは10.6±1.9ng/100mlから53.9±10.1ng/100ml へと約 5.1倍 の 増加 を 示し,18 - OH -B は11.3±1.8ng/100mlから45.7±6.7ng/100mlへと平均 4.4倍の増加を示した(P<0.001)。この際の cortisol の増加率は3.4倍であった。
2) Dexamethasone 抑制試験
Dexamethasone 1 mg による rapid dexamethasone 抑制試験では,血中18- OH-DOC および18 - OH - B 濃度は、それぞれ2.4±1.2ng/100ml,2.2±0.9ng/100mlへと, cortisol 同様(1.3±0.6 μg/100ml)ほぼ完全に抑制された。
3) 立位負荷試験
2 時間の立位負荷では,18 - OH -DOC は18.3±3.2ng/100mlへ,18 -OH - B は20.3±3.8ng/ 100mlへと有意に増加した(P<0.001)。この際の血漿 cortisol は, 6.5±1.5μg/100ml から4.6± 1.2μg/100mlへと減少傾向を示した。
(3) 副腎皮質機能異常症 (Fig. 2, Fig. 3)
1) Cushing 症候群
副腎皮質過形成7例中3例では、血中18- OH -DOC と18 - OH-B の両者に増加がみられた。 一方,腺腫例5例では、両ステロイドはともに正常範囲内の値を示した。副腎皮質癌による本症候 群では,18- OH -DOC および18-OH-B は、極めて高値であった。
2) Hyperaldosteronism
原発性アルドステロン症6例中3例で18-OH-DOC は増加しており,18- OH -B は8例中5例 で増加していた。
特発性アルドステロン症2例では, 18-OH - DOC および18 -OH-B は,ともに増加しており特 に1例の18-OH - DOC は著しい高値を示した。
3) 先天性副腎皮質酵素欠損症ならびに副腎性器症候群
著名な低K血症と高血圧とを示す先天性17α-hydroxylase 欠損症 2例では, 18 - OH - DOC およ び18-OH-Bは、極めて高値であった。この2例に betamethasone 投与による治療を開始したとこ ろ,両ステロイドはともに正常範囲内の値を示すようになった。
0 10 20 30 40 50 60 70 09/100ml
| Normal Subjects | Male | 900990 000 88 00000 | |
| Female | Follicular Phase | - 888 | |
| Luteal Phase | |||
| Cushing's Syndrome | Adenoma | 00 ... | |
| Hyperplasia | ... . . · | ||
| Carcinoma | 188 0 | ||
| Hyperaldo - steronism | Adenoma | . ... % | |
| Idiopathic | 192 0 . | ||
| 17 a-Hydroxylase deficiency | · o | ||
| Adrenogenital Syndrome | 21-Hydroxylase deficiency | ||
| Carcinoma | ... | ||
| Addison's disease | go 0 | ||
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 09/100ml
| Normal Subjects | Male | 000000 88888 | |
| Female | Follicular Phase | ...... Y 8 | |
| Luteal Phase | |||
| Cushing's Syndrome | Adenoma | O | |
| Hyperplasia | · ... . · | ||
| Carcinoma | |||
| Hyperaldo - steronism | Adenoma | .. .. . . 0 | |
| Idiopathic | · | ||
| 17 a-Hydroxylase deficiency | · 0 | ||
| Adrenogenital Syndrome | 21-Hydroxylase deficiency | ||
| Carcinoma | ... | ||
| Addison's disease | |||
Fig. 3. Plasma levels of 18-OH-B in patients with adrenocortical disorders.
副腎性器症候群を呈する疾患のうち先天性21 α-hydroxylase 欠損症の単純型2例における,18- OH - DOC は,正常高値ないしは高値を示し,18-OH -B は,正常値を示した。しかし,Na 喪失型 では、両ステロイドは、低値であった。副腎癌による副腎性器症候群における両ステロイドは,正 常域に留まった。
4) Addison 病
副腎皮質機能低下症として、結核性と思われる Addison 病を選んだが, 18 -OH - DOC および18 - OH - B は共に低値であった。
(3) In vitro でのステロイド生成
2例の乳癌患者の手術摘出副腎皮質を対照例としたが、対照時の18- OH - DOC および18-OH- Bの産生量は、それぞれ平均31ng/g tissue/hr, 26ng/g tissue/hrと, aldosterone の産生量にほぼ 匹敵した318-OH - DOC および18-OH - B の産生量は, ACTH の添加に対しては、それぞれ約 7.4倍,約5.2倍の増加を,angiotensin II の添加に対しては、それぞれ約1.9倍,約2.5倍の増加を示 Ltc (P<0.01) (Fig. 4, Fig, 5 ).
ACTH
ACTH
200
200
ng/g tissue/hr
Qa
100|
100
0
0
Before
After
Before
After
18-OH-DOC
18-OH-B
80
A-II
80
A-II
60
60-
0
ng/g tissue/hr
40
40-
00
20
20
0
0
Before
After
Before
after
18-OH-DOC
18-OH-B
A-11 : angiotensin II
Cushing 型副腎癌患者では、末梢血中の18-OH- DOC ならびに18- OH - B は著増していたが, in vitro での単位重量あたりの両ステロイドの生成は極めて少なく、かつ ACTH および angioten- sin II の添加に対して全く反応を示さなかった(Fig. 6)。
原発性アルドステロン症の副腎皮質腺腫組織における18-OH-DOC と18-OH - Bの生成量は, 正常対照副腎組織の20~40倍と極めて高いことがわかった。また、この組織の両ステロイドの生成 は、全例で ACTH に対して約2倍の, angiotensin II に対しては1.5倍の増加を示した(Fig. 7)。 腺腫に隣接する副腎皮質組織における両ステロイドの生成量は、ほぼ正常対照例と同程度であり, ACTH および angiotensin II の負荷に対しても同様の増加を示した。
特発性アルドステロン症1例における18- OH-DOC および18-OH-B の産生は、著しく多く, 原発性アルドステロン症の腺腫組織を上まわった。しかし, ACTH および angiotensin II の添加に は全く反応を示さなかった(Fig. 8)。
200-
ACTH
Normal range
200
ACTH
ng/g tissue/hr
Normal range
100
100|
0
0
Q
0
O
o
A-11
A-II
60
60
ng/g tissue/hr
40.
40
20
20
0
O
O
0
O
0
Before
After
Before
After
18-OH-DOC
18-OH-B
ACTH
0
1000
+
0
ACTH
0
1000
+
ng/g tissue/hr
õ
00
0
500
500
0
8
.
0
0
Before
After
Before
After
1000
A-1I *
1000
A-11
*
ng/g tissue/hr
0
00
0
500
500
0
0
0
Before
After
Before
After
18-OH-DOC
18-OH-B
ACTH
ACTH
ng/g tissue/hr
o
O
0
0
500
$00
101010100000111010
0
Before
After
0
Before
After
A-II
A-11
↓
↓
ng/g tissue/hr
.
O
0
0-
O
500
500
0
Before
After
0
Before
After
18 -OH-DOC
18 -OH -B
Ⅳ. 考 案
近年,感度の良い18-OH-DOC の測定法が開発され、1)4)~ 6) ヒトにおける 18 -OH -DOC の分泌 調節あるいは各種高血圧疾患におけるその動態が徐々に明らかにされてきている。2 3) 7)~ 9) 18-OH - B については, Martin ら10 の報告の他にみるべきものがなく、各種疾患について分析した成績は 皆無に近い。
著者らは、先に, radioimmunoassay による 18- OH - DOC と18 - OH - B の同時測定法を開発し たが,2 これを応用し,正常者における両ステロイドの分泌調節がいかになされているかを検討した。 また,副腎皮質機能異常症における両ステロイドの血中濃度を分析した上,副腎皮質腫瘍の1部の 例については、手術摘出組織片を incubate し, in vitro での産生分泌状態をみた。
まず,正常者における18-OH - DOC および18-OH-B の血中濃度は,ACTH 負荷により,それ ぞれ5.1倍,4.4倍へと増加し,dexamethasone によりほぼ完全に抑制された。これは, 18 - OH - DOC および 18-OH-B が ACTH によって分泌調節されていることを示す所見である。18-OH -DOC がACTH によって分泌調節されていることは, Melby 1112 ら, Willams “ら, Tuck 8)らによっても明 らかにされているが, 今回著者らの得た増加率は、彼らの17~24倍という成績に比べて、はるかに 少ない。これは、彼らの多くが, ACTH を点滴静注しているなど、投与方法の違い,採血時間の相 違などに基づく差異と考えられる。最近になり, Williams 7らの研究グループの1員である Moore 9) らは、ラットの副腎皮質球状層細胞の浮遊液を用いた in vitro の実験系に 1-24ACTH 添加したとこ ろ,18 - OH-DOC が約 9倍に増加したと報告しており著者らのヒト正常副腎薄片における増加率 7.4倍 と、ほぼ同程度の反応とみなされる。
18- OH - DOC の分泌調節に renin - angiotensin 系が関与するか否かについては、諸説がある。 1972年に Melby lらは、ヒトの18-OH - DOC の分泌量は angiotensin 投与時に変化せず, Na 負荷 時に低下を,Na制限時に増加をみるとしている。更に, Na制限に先立ち dexamethasone を投与する と, 18 -OH-DOC に増加がみられなくなることから, Na制限というストレスにより ACTH分泌増 多が引き起こされ、これを介して18-OH-DOC の増加がもたらされたものと推測している。その 後,Melby ら同様に, angiotensin II により 18 -OH -DOC に増加がみられないという報告と,有 意の増加がみられたという報告があり、未だ一致した見解は得られていない。一方, angiotensin II を直接投与せずに、立位負荷を行って18-OH-DOC の動態を検討しているグループもある。Cha- ndler )らは3時間の立位で,Dale らは4 時間の立位 4) で18 - OH -DOC の血中濃度の平均が,そ れぞれ2倍以上,約1.6倍へと増加することを認めている。今回,著者らは、前2者の報告よりも少 ない 2時間の立位歩行で血漿18-OH-DOC が10.3±4.2ng/100mlから18.3±3.2ng/100mlへと有 意に増加する(P<0.01)という成績を得た。しかも、この際の血漿 cortisol レベルは,日内変動 によってかえって減少傾向を示すことから(Table. 2), 18 - OH - DOC の分泌には renin -angio- tensin 系が直接関与するものと推測される。著者は,正常副腎組織片を用いたin vitro の実験系で angiotensin II 添加を行い, 18-OH-DOC の産生放出が約1.9倍に増加することを確認した。Moore ら9)も, ラットの球状層細胞浮遊液中に angiotensin II を添加し,約2 倍の増加をみている。これら の成績を総合すると,18- OH -DOC の分泌には, renin - angiotensin 系の直接の関与があるもの と考えられる。
18- OH - B については, Martin 10 らにより,立位負荷で安静時より有意の増加をみたと報告さ れている。しかし、彼らは、対象者をわずか30分間臥床させただけで、しかも午前10時半に採血を 行い対照時の血中値としている。その上,立位負荷後の採血は午前8時30分に施行しているが,立 位を何時間負荷したかは不明であるなど,本ステロイドの日内変動を考慮しておらず、条件設定が 必ずしも満足できるわけではない。18-OH -B は, aldosterone 生合成の重要な中間代謝産物であ るが,その分泌調節機構などについて詳細を検討した報告は未だみられない。著者らは今回, 18- OH - B も 18-OH -DOC と同様に ACTH ならびに renin - angiotensin の2つの系により分泌調節 されていることを, in vivo および in vitro から証明したが,これは今後種々の病態解明に役立つも のと考えられる。
前にも述べたように, 18-OH - DOC および 18-OH - B は弱い電解質作用をもつことからald- osterone が正常域に留まるような各種高血圧症の成因となり得るか否かについて、大きな興味がも たれてきた。中でも,本態性高血圧症における18-OH-DOC の動態は、比較的早くから研究され ている。まず,Melby lらは, radioimmunoassay の開発される以前から蛍光法により本態性高血圧 症患者における尿中18-OH-DOC の排泄量を測定しており, Nowaczynski 13 らは, 18-OH-DOC の1日分泌量を検討している。彼らは、一部の本態性高血圧症例,特に血漿レニン活性の抑制され ている例に本ステロイドの増加がみられることから、高血圧発症に何らかの関与をもつものと推測 している。
高血圧を示す副腎皮質機能亢進症においてもまた,18 - OH -DOC および18-OH-B がその成因 となるか否かについては興味深く思われている。Melby 111 12 らにより,原発性アルドステロン症, 下垂体性 Cushing 症候群,先天性 17 α-hydroxylase 欠損症例では, 18 - OH -DOC の尿中排泄量に 増加がみられるとの報告がなされている。特に、後2 者では本ステロイドの増加が大きな minera-
locorticoid 作用を示し,高血圧ならびに低K血の原因となるのではないかと推測している。著者は, 副腎皮質機能異常症について, 18 -OH - DOC の他に18-OH - B を同時に分析して、これらの病態 の解明に資したいと考えた。
まず, Cushing 症候群を呈する症例のうち副腎皮質腺腫による例では, 18 - OH - DOC および 18 - OH - B は共に正常範囲にとどまり,副腎皮質過形成例では、約40%に両ステロイドの増加がみら れた。後者では、慢性の ACTH の過剰分泌がその原因と考えられる。副腎癌による例では、両ステ ロイドの血中濃度は極めて高いが in vitro における産生は著しく少なく、内分泌活性を示す副腎 癌組織におけるステロイド産生量は、本来の副腎皮質組織の産生量に比べて低いものと考えられた。
原発性アルドステロン症では、約50%の例に血中18- OH-DOC および18-OH- B の増加がみら れた。In vitro では、腺腫組織内における両ステロイドの産生は著しく多く、 腺腫に隣接する副腎 皮質組織における両ステロイドの産生は正常域にとどまった。このため、血中に増加した両ステロ イドは,腺腫組織に由来するものと考えられた。両ステロイドが過剰に産生される機序はなお不明 であるが,アルドステロン症腺腫が, aldosterone のみを過剰に分泌するものではなく、その前駆 ステロイドを多量に生成していることは極めて興味深い。なお、今回の in vitro の実験では,本症 の副腎腺腫における18- OH -DOC と18 -OH -B の産生は,ACTH 依存性をもつものと推測され た。特発性アルドステロン症2例でも,18- OH - DOC および18-OH-B の血中濃度は著しく増加 していた。このうち1例の副腎皮質組織片における in vitro での両ステロイドの産生は極めて多か ったが, ACTH の添加に対する増加は、ほとんど認められなかった。以上の原発性アルドステロン 症の腺腫組織と特発性アルドステロン症の副腎皮質組織にみられる in vitro での18-OH -DOC お よび18-OH- B の生成の差は,副腎病変の起因因子の差を反映しているものかもしれないが、症例 数を更に積み重ねる必要がある。
先天性17α-hydroxylase 欠損症2例では,18- OH -DOC および18-OH-B は著しく増加してお り, dexamethasone で正常範囲内の値に低下した。本症では、慢性の ACTH 過剰が両ステロイドの 増加の原因と考えられた。
先天性の21α -hydroxylase 欠損症のうち単純型では, 18-OH - B は低値を示したが, 18 - OH - DOCはやや高値であった。一方,Na 喪失型では,18- OH - DOC および18-OH - B は共に低値を示 した。単純型で塩類喪失が起こりにくいのは,21 α-hydroxylase 系の障害の程度が低いことに加え, おそらく増加した progesterone から18- OH - DOC への転換量が多いことも一因と考えられた。副 腎癌による副腎性器症候群では、両ステロイドは正常範囲内の値を示した。In vitroでの両ステロ イドの生成はみていないが、おそらく癌に接する既存の副腎組織および他側の副腎皮質組織に由来 するものと推測された。
Addison 病では、両ステロイドは低値を示したが,これは、ステロイド産生の場の崩壊によるも のと考えられた。
V. 結 語
先に開発した 18-hydroxy- 11-deoxycorticosterone (18-OH-DOC)と 18-hydroxycorticosterone (18-OH-B) の同時測定法を応用し,正常者における両ステロイドの分泌調節因子を検討し,副腎 皮質機能異常症患者の血中濃度を分析した。一部の副腎皮質腫瘍例では、手術摘出腫瘍組織片を用 いて in vitro での両ステロイドの産生状態をみた。これにより,以下の成績が得られた。
1) 正常男子20例の普通食摂取下,安静臥床 後の午前8時~9時における血漿 18-OH-DOCの平 均は8.2±3.9ng/100ml,18-OH-B の平均は 10.3±4.2ng/100ml であった。正常女子10例の卵胞期 における 18-OH-DOC の平均は 7.8±2.6ng/100ml,18-OH-B の平均は 12.4±4.5ng/100mlであり, 男女差は認められなかった。また、黄体期における 18-OH-DOC および 18-OH-B の平均は、それ ぞれ, 11.5±2.8ng/100ml,13.8±4.1ng/100ml で、卵胞期との間に有意差をみなかった。
2) 正常者では、18-OH-DOC と18-OH-B の血中濃度は ACTH により著明に増加し, dexamet- hasone 投与により完全に抑制された。また、この両ステロイドは、立位負荷でも有意の増加を示し た。この成績から, 18-OH-DOC と18-OH-B は, ACTH と renin-angiotensin 系の二重支配を受 けているものと考えられる。
3) 高血圧と低K血を示す副腎皮質疾患のうち,Cushing 症候群の腺腫例では血中 18-OH-DOC および 18-OH-B は正常値を示していたが、 過形成例の約半数に増加がみられた。副腎癌による例 では、両ステロイドの血中値は極めて増加していたが, in vitro での産生量は正常対照副腎に比べ て著しく少かった。
4) 原発性アルドステロン症の約半数の例に,18-OH-DOCおよび18-OH-Bの血中濃度の増加がみ られた。In vitro では,腺腫組織における両ステロイドの産生が増加しており,ACTH の添加に反 応することが判明した。特発性アルドステロン症例でも両ステロイドの血中濃度ならびに in vitro での産生量の増加をみたが, ACTH に対する増加反応は認められなかった。
5) 18-OH-DOCおよび18-OH-Bの血中濃度は,先天性17 α-hydroxylase欠損症では著明に増加し ていた。先天性21 α-hydroxylase 欠損症のうち Na 喪失型では、両ステロイドは共に低下していたが、 単純型では, 18-OH-DOC は高値を示した。また、この両ステロイドは、副腎癌による副腎性器症 候群では正常値にとどまり, Addison 病では低値を示した。
ご校閲いただいた東北大学第2病理学教室,笹野伸昭教授にお礼申しあげます。
なお,本研究の一部は、文部省科学研究費(代表·笹野伸昭教授)によった。本研究の一部につ いては、第52回日本内分泌学会総会(1978年6月,京都)で発表した。
文 献
1) Ojima, M., Aida, M. and Kambegawa, A .: Simultaneous determination of plasma 11- deoxycorticosterone, 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone and aldosterone in man, Tohoku J. exp. Med., 124: 367-379, 1978. 2) Ojima, M. and Kambegawa, A .: Simultane- ous measurement of plasma concentrations of 18-hydroxycorticosterone and 18-hydroxy- 11-deoxycorticosterone in normal subjects and adrenocortical disorders. Tohoku J. exp. Med., in press. 1980. 3) 小島元子:原発性アルドステロン症にみられるステロイド分泌異常 について、日内分泌会誌, 54: 246-252, 1978. 4) Dale, S.L., Komanicky, P., Pratt, J.H. and Melby, J.C .: Radioimmunoassay of 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone in plasma. J. Clin. Endocrinol. Metab., 43: 803-819, 1976. 5) Chandler, D.W., Tuck, M. and Mayes, D.M .: The measurement of 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone in human plasma by radioimmunoassay. Steroids, 27: 235-246, 1976.
6)中嶋凱夫,春山和見,福地総逸:血漿18-hydroxy-11-deoxycorticosterone (18-OH-DOC)の測定法 とその臨床応用. 日内分泌会誌,53: 960-969,1977. 7) Williams, G.H., Braley, L. M. and Underwood, R.H .: The regulation of 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone in man. J. Clin. Endocrinol. Metab., 58: 221-229, 1976. 8) Tuck, M.L., Chandler, D.W. and Mayes, D.M .: The influences of ACTH, dietary sodium, upright posture and angiotensin II on plasma 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone levels in normal subjects. J. Clin. Endo- crinol. Metab., 45: 893-902, 1977. 9) Moore, T.J., Barley, J.M. and Williams, G.H .: Stimulation of 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone secretion by angiotensin II and potassium. Endocrinology, 103: 152-155, 1978.
10) Martin, V.I., Edwards, C. R.W., Biglieli, E.G., Vinson G.P. and Bartter, F.C .: The development and application of a radioimmunoassay for 18-hydroxycorticosterone. Steroids, 26: 591-604, 1975.
11) Melby, J.C. Dale, S.L. Grekin, R.J. Gaunt, R. and Wilson, T.E .: 18-hydroxy-11-deoxy- corticosterone (18-OH-DOC) secretion in experimental and human hypertension. Resent Progr. Horm. Res., 28: 287-351, 1972. 12) Melby, J.C .: 18-OH-DOC in clinical and experimental hypertension. 340-348, Ed, by Genest, J., Koiw, E. and Kuchel, O., Hypertension, McGraw-Hill Book Company, New York, 1977.
13) Nowaczynski, W., Kuchel, O., Genest, J., Messerli, F.H., Honda, M., Tolis, G., Seth, K., Rarvin-Pande, R., Kubo, S., Grose, J., Ledoux, F. and Lebel, M .: Dinamic aldosterone and 18-hydroxydeoxycorticosterone studies in labile and stable benign essential hyper- tension. J. Steroid Biochem., 6: 767-778, 1975.